1、藥品中污染的微生物處于不穩定狀態，微生物種類具有不確定性； 2、在藥品生產各個環節中, 微生物污染存在著不均勻性； 3、無論是無抑菌性藥物還是抑菌性藥物都要進行微生物限度檢查，特別是污染于抑菌藥物中的微生物在一定條件下可以穩定存在一段時間，雖然它們可能受到損傷，但未死亡，如服用至人體內, 當條件適宜時仍可生長繁殖。 4、某些藥物在試驗條件下呈現抑菌作用并干擾待檢菌的檢出或計數, 但當服用后受到胃液及腸液的稀釋, 抑菌作用減弱或直接靜脈注射入血液, 細菌便可復蘇并繁殖, 對人體造成危害。封閉式薄膜過濾器 5、任何一種抑菌藥物均有一定的抑菌范圍，即抗菌譜。相當多的抗細菌藥微生物限度檢測儀物對真菌毫無作用。對所有菌類均敏感的藥物幾乎不存在。 6、細菌對抑菌藥物有適應性，耐藥性致病菌株在臨床上屢見不鮮，所以抑菌藥物內是可能存在微生物并可對人體健康造成危害的，因此對抑菌性藥物也有必要進行微生物限度檢查，但抑菌性藥物在檢查過程中會有明顯的抑菌作用，這在很大程度上影響了微生物的檢出。 具備這些驗證條件，你就可以進行驗證試驗了 1、驗證實驗的設施、設備、器具和材料 2、驗證試驗用的稀釋劑( 液) 、沖洗液 3、具抑菌性樣品處理方法 培養基稀釋法：該法一般適合于抑菌作用不是很強的供試品。 化學試劑中和法 薄膜過濾法該法：常見的檢查方法，適合于可濾過的供試品，特別是無菌檢查。 離心沉淀法：常用于抑菌活性較強而又無法直接過濾的供試品，特別是不溶于水的固體中藥制劑。
驗證步驟：1、根據樣品特性，制定檢驗方法和檢驗條件； 2、保證驗證試驗所用的儀器、培養基和試劑等均符合試驗要求； 3、按制定的方法進行試驗； 4、根據驗證結果，判斷是否符合驗證的標準。若符合，按驗證的方法和條件進行藥品的微生物限度檢查；若不符合，應重新設立驗證方案，再進行驗證，直至驗證結果符合設立的驗證標準。 Tips：驗證時，按供試液的制備和細菌、霉菌及酵母菌計數所規定的方法及要求進行。對各試驗菌的回收率應逐一進行驗證。驗證試驗至少應進行3次獨立的平行試驗，并分別計算各試驗菌每次試驗的回收率。 驗證用菌株？？？ 細菌計數驗證用菌株：大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌 霉菌、酵母菌計數驗證用菌株：白色念珠菌、黑曲霉 菌株選擇原則：代表性、普遍性、低或非致病性，標準菌株（或該藥品中常見污染菌） 菌株的要求：不得超過5代、采用適宜的方法保存、加菌量：50-100cfu。 總結 微生物學檢查是藥品常規安全性檢查的重要組成部分，驗證工作十分繁瑣，對準確檢測出藥品中微生物的真實含量具有一定的指導意義和實用價值，是藥品檢測環節不可或缺的步驟。
實驗室快速檢測是指利用一切可以利用的實驗室儀器設備快速定性和定量。理化方法一般在2小時內能夠出結果的即可視為快速檢測。微生物快速檢測與常規檢測相比，能夠減少1/2或1/3的時間，且有判斷性意義的結果即可視為快速檢測。酶聯免疫法一般能夠在3~4小時得出結果，也算是快速檢測。實驗室的快速檢測嚴格按照標準操作規范開展檢驗，著重于挖掘現有設備潛力、更新儀器設備以及改變樣品前處理的方式，實現快速篩查的目的，故其有別于實驗室常規檢測。高效的前處理方法是快速分析檢測的關鍵，傳統的樣品前處理方法有液-液萃取、封閉式薄膜過濾器索氏提取、蒸餾、離心、沉淀分離和離子交換等，這些方法都比較費時、費力而且不易達到自動化操作。近年來，一些新型的樣品前處理技術如固相萃取、磁性固相萃取、固相微萃取、聚合物整體柱微萃取等得到了迅速發展，這些前處理技術能夠滿足快速、高選擇性、樣品使用量少、試劑消耗少、自動化程度高和環境友好的要求，與氣相色譜及其聯用、液相色譜及其聯用、質譜等實驗室儀器相結www.shxile.com合，達到了快速檢測食品中農藥殘留、食品添加劑、獸藥殘留、重金屬等項目的目的。如毛細管電泳儀以其樣品處理簡單、多組分同時測定、快速、自動化及越來越低的檢出限，被廣泛應用在食品農藥獸藥殘留、非法添加劑、生物毒素等方面的檢測。另外，實驗室快速檢測儀器—PCR (polymerase chain-reaction，聚合酶鏈式反應)儀及實時熒光定量PCR儀由于從樣品前處理到PCR擴增及得到實驗結果24小時內完成，具有簡便、快速、敏感性高、特異性強和對標本的純度要求低的優點，現已被廣泛應用于微生物檢測等領域。自從1996年美國ABI公司推出了將擴增和檢測融為一體的實時熒光定量PCR儀后，很多公司如德國的Eppendorf、瑞士的ROCHE和美國的MJ等都先后推出了款式不同的定量PCR儀。實驗室快速檢測儀器還有一類是不需要前處理的，如近紅外光譜儀、拉曼光譜儀和核磁共振譜儀，由于其無損、快速的特點與優勢，儀器制造廠商將其開發為便攜式儀器，已經逐漸從實驗室走向現場檢測。