無菌檢查方法是為了檢查藥典要求無菌的制劑及其他制品是否無菌而建立的試驗方法，是作為無菌產品批放行的重要依據及藥監部門對無菌產品質量監管的一個重要項目。因此如何確保無菌檢查方法的準確可靠至關重要，而檢查方法的驗證是保證檢查結果的公正、科學和準確的基礎，因此各個主要國家的GMP或藥典都對無菌檢查方法的驗證提出了嚴格的要求，2010版中國藥典對分析方法驗證和檢查的要求也有大幅度的提高，同時也是GMP檢查中檢查的重點和容易發現問題的區域。無菌檢查方法驗薄膜過濾器證一般分為前驗證和再驗證兩種。前驗證，也稱預驗證，指在無菌分析方法正式使用前，按照預定驗證方案進行的驗證。如果沒有充分的理由，任何檢查方法必須進行前驗證。再驗證，指某一檢查方法經過驗證并在使用一段時間后進行的，旨在證實已驗證狀態沒有發生飄移而進行的重新驗證及對檢查方法進行修訂、改變時進行的驗證。通常一個無菌產品的檢查流程為：首先基于產品的劑型、溶解度等性質，按照藥典的要求確定是否需要進行前處理;然后根據產品的特性是否有抑菌性，確定是否需要增加去除產品抑菌性的方法;最后驗證整個檢查方法中用到的一切及試驗過程中的每一個環節包括樣品的預處理方式、檢查過程、培養條件等均不影響樣品中微生物的生長。這里，驗證的重點環節包括：前處理方法直接影響后續步驟的效果和重現性，應是驗證的重點。供試品中抑菌活性的去除是當前驗證工作的重點，尤其強調應充分驗證供試品本身對微生物生長的影響。無菌產品中每個成分應該是均勻的，因此只要確定在驗證的方法中，按所需的總接種量即可，而不必像樣品薄膜過濾器日常檢測中按規定的容器數取樣。如果制備樣品時需要使用溶解劑、稀釋劑、助溶劑、破乳劑等溶劑，需要確保這些溶劑是有效的、并且其使用對微生物生長無影響;或者制備過程中需要對樣品進行加熱助溶、離心等操作是，需要確保加熱的溫度、離心速度和離心時間等對微生物生長或分布無影響。不需前處理的樣品免做。無抑菌性樣品的驗證方法：依據產品溶解性和微生物限度選擇合適的中性稀釋劑溶解和稀釋，用直接接種法驗證，常用中性稀釋液或淋洗液。對于具有抑菌性樣品的驗證方法，首先確定樣品的抑菌作用(抑細菌、真菌試驗驗證)，選擇敏感標準菌株對供試品抑菌活性去除效果檢查(陽性菌回收試驗)。薄膜過濾法：按照藥典的要求取每種培養基規定接種的樣品總量按薄膜過濾法過濾，沖洗，在最后一次的沖洗液中加入小于100cfu的試驗菌，過濾。取出濾膜接種至硫乙醇酸鹽流體培養或改良馬丁培養基中，或將培養基加至濾桶內。另取一裝有同體積培養基的容器，加入等量試驗菌，作為對照。按照藥典的要求的溫度和時間進行培養。
