通常一個無菌產品的檢查流程為:首先基于產品的劑型、溶解度等性質,按照藥典的要求確定是否需要進行前處理;然后根據產品的特性是否有抑菌性,確定是否需要增加去除產品抑菌性的方法;最后驗證整個檢查方法中用到的一切及試驗過程中的每一個環節包括樣品的預處理方式、檢查過程、培養條件等均不影響樣品中微生物的生長。無菌產品中每個成分應該是均勻的,因此只要確定在驗證的方法中,按所需的總接種量即可,而不必像樣品日常檢測中按規定的容器數取樣。如果制備樣品時需要使用無菌檢查薄膜過濾器溶解劑、稀釋劑、助溶劑、破乳劑等溶劑,需要確保這些溶劑是有效的,并且其使用對微生物生長無影響;或者制備過程中需要對樣品進行加熱助溶、離心等操作時,需要確保加熱的溫度、離心速度和離心時間等對微生物生長或分布無影響。 不需前處理的樣品免做。無抑菌性樣品的驗證方法:依據產品溶解性和微生物限度選擇合適的中性稀釋劑溶解和稀釋,用直接接種法驗證,常用中性稀釋液或淋洗液。對于具有抑菌性樣品的驗證方法,首先確定樣品的抑菌作用(抑細菌、真菌試驗驗證),選擇敏感標準菌株對供試品抑菌活性去除效果檢查(陽性菌回收試驗)。 常用的消除樣品抑菌活性的方法如下:稀釋法:利用降低供試品的相對濃度,將樣品稀釋至最低抑菌濃度下進行。如:取規定量的樣品溶液至較大量的培養基中,使單位體積內的樣品含量減少,至不含抑菌作用。薄膜過濾法:利用體積差異分離,通過薄膜過濾,微生物被截于濾膜,培養薄膜觀察有無微生物生長。通常薄膜孔徑應不大于0.45μm,直徑一般為50?mm,若采用其他直徑的濾膜,沖洗量應進行相應無菌檢查薄膜過濾器的調整。濾器和濾膜在使用前采用適宜的方法進行滅菌。使用時應保證濾膜在過濾前后的完整性。水溶性供試液過濾前先將少量的沖洗液過濾以潤濕濾膜。油類供試液其濾膜和濾器在使用前應充分干燥。供試液經過濾膜過濾后,若需要用沖洗液沖洗濾膜,每張濾膜每次沖洗量為100?ml。總沖洗量不得超過1000ml。